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蛋白酶K的配制標準及保存方法

更新時(shí)間：2021-10-26      點(diǎn)擊次數：1097
     蛋白酶K廣泛應用于分子生物學(xué),藥理學(xué)等科研方面.一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關(guān)的絲氨酸蛋白酶,具有很高的比活性.一般儲存在-20°C,避光防潮密閉干燥。
　　蛋白酶Ｋ主要應用于基因檢測中基因抽取，是檢測試劑盒生產(chǎn)的重要原料，蛋白酶K產(chǎn)品由于在尿素和SDS中仍然具有降解天然蛋白質(zhì)的能力，因而被廣泛應用于制備脈沖電泳的染色體DNA，以及去除DNA和RNA中的核酸酶?，F有基因抽提及檢測試劑盒中均需配備該酶。
　　蛋白酶K配制標準：20mg/ml蛋白酶K配制標準(proteinaseK)：將200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中，輕輕搖動(dòng)，直至蛋白酶K*溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。
　　蛋白酶K的保存：保存在-20℃冰箱里，避免反復凍融，有效保證12月。
　　蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理，它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用，以增加探針與靶核酸結合的機會(huì )，提高雜交信號.但蛋白酶K的濃度過(guò)高、消化時(shí)間過(guò)長(cháng)或孵育溫度過(guò)高時(shí)，都會(huì )對細胞的結構有一定的破壞，導致組織切片的脫落，細胞核的消失，從而影響雜交結果。EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用，解決上述出現的問(wèn)題，并能達到理想的染色效果。
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